作者：張紅，劉明華，馮文宇，陳維剛，黃興武，肖順漢
摘要 目的: 觀察雙青咽喉片抗炎、鎮(zhèn)咳、祛痰及鎮(zhèn)痛作用。 方法: 通過蛋清所致大鼠足趾腫脹實驗、腹腔注射醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增高實驗、二甲苯誘發(fā)小鼠耳廓腫實驗觀察雙青咽喉片的抗炎作用;通過濃氨水所致小鼠咳嗽實驗和小鼠氣管排泌酚紅實驗觀察雙青咽喉片的鎮(zhèn)咳和祛痰作用;通過醋酸和熱板刺激所致小鼠疼痛反應(yīng)實驗觀察雙青咽喉片的鎮(zhèn)痛作用。 結(jié)果: 雙青咽喉片能明顯減輕蛋清引起的炎癥反應(yīng)，降低腹腔毛細(xì)血管通透性，顯著降低二甲苯致小鼠耳廓的腫脹度，并能明顯減少濃氨水引起小鼠的咳嗽次數(shù)，增加氣管排泌酚紅的作用，減少醋酸致小鼠的扭體次數(shù)，提高小鼠對熱刺激的痛閾值。 結(jié)論: 雙青咽喉片具有抗炎、鎮(zhèn)咳、祛痰及鎮(zhèn)痛作用。
關(guān)鍵詞 雙青咽喉片;急慢性咽喉炎;抗炎;鎮(zhèn)咳;鎮(zhèn)痛
咽喉炎是一種常見疾病，根據(jù)病程可分為急性和慢性兩大類，祖國醫(yī)學(xué)統(tǒng)稱為“喉痹”。由于其病因不同，臨床用藥也不同。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)大多采用抗生素類和抗病毒藥物治療，但效果不佳，易反復(fù)發(fā)作，是由于常見致病微生物對抗生素藥物產(chǎn)生耐藥性之故，于是人們將目光轉(zhuǎn)向中醫(yī)藥。 [1] 雙青咽喉片是一種我院新開發(fā)的中藥有效成分研制的制劑，由青蒿、金銀花、青果等中藥組成，具有清熱滋陰、利咽生津等功效，臨床用于治療急慢性咽喉炎。本文就其治療急慢性咽喉炎的藥效作出如下研究。
1 材料
1.1 藥物與試劑 雙青咽喉片:由瀘州醫(yī)學(xué)院藥研所提供，應(yīng)用時配成液體劑型，每毫升含藥物有效成分24mg(批號:050602);銀黃含片:由成都地奧制藥集團有限公司生產(chǎn)(批號:0412070);阿司匹林腸溶片:由西安博華制藥有限責(zé)任公司生產(chǎn)(批號:0405024);復(fù)方甘草片:由西南藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)(批號:050327);酚紅:AR級，上海試劑三廠生產(chǎn)(批號:990706);醋酸:分析純，成都石羊化學(xué)試劑廠生產(chǎn)(批號:20041225)。
1.2 動物 Wistar種大鼠，140～160克，雄性;KM種小鼠，18～22克，雌雄各半，Ⅰ級合格動物，合格證號:川醫(yī)動字第056，由瀘州醫(yī)學(xué)院動物科提供。
1.3 儀器 722型分光光度計:上海精密科學(xué)儀器有限公司，型號SFZ1606013223;電子天平:沈陽龍騰電子稱量儀器有限公司，型號ES1201-4。
1.4 統(tǒng)計方法 由SPSS10.0軟件完成。
2 實驗方法與結(jié)果
2.1 抗炎實驗 [2]
2.1.1 雙青咽喉片對蛋清所致大鼠足趾腫脹的影響健康大鼠隨機分成六組，每組10只，分別灌胃給予阿司匹林0.1g?kg -1 、銀黃含片2.6g?kg -1 、雙青咽喉片(0.03g?kg -1 、0.06g?kg -1 、0.12g?kg -1 )及等容量的生理鹽水，一天一次，連續(xù)七天，第八天給藥1小時后同時測出其正常右后足跖容積。于大鼠右后足跖掌腱膜下注入雞蛋清0.1ml/只，然后分別于1h、2h、3h、4h、5h、6h測定其右后足跖容積，計算出腫脹值(致炎前后容積之差)。結(jié)果見表1。
表1 雙青咽喉片對蛋清所致大鼠足趾腫脹的影響(略)
與對照組比較*P<0.05，**P<0.01
2.1.2 雙青咽喉片對小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響 健康KM小鼠隨機分成五組，每組10只，分別灌胃給予阿司匹林0.1g?kg -1 、雙青咽喉片(0.03g?kg -1 、0.06g?kg -1 、0.12g?kg -1 )及等容量的生理鹽水，一天一次，連續(xù)七天，第八天給藥1小時后，從尾靜脈注入0.5%伊文思蘭0.1ml/10g，隨即腹腔注射0.6%冰醋酸0.2ml/只，20分鐘后處死，打開腹腔，用6ml生理鹽水分?jǐn)?shù)次洗滌腹腔，吸出洗滌液(若有出血應(yīng)該棄之不用)合并加入NS.至10ml，3000rpm離心15分鐘，取上清夜于590nm比色測定其OD值，并進行組間比較其顯著性。結(jié)果見表2。
表2 雙青咽喉片對小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響(略)
與對照組比較*P<0.05
2.1.3 雙青咽喉片對二甲苯誘發(fā)小鼠耳廓腫的影響 小鼠分組及灌胃同2.1.2，第八天給藥1小時后，于一側(cè)耳廓正反兩面均勻涂抹二甲苯0.1ml，15分鐘后處死，沿耳廓基線剪下兩耳，于同一部位用打孔器打下直徑9mm耳片經(jīng)用電子天平稱重，以兩耳片重量之差為腫脹度，并進行組間比較其顯著性。結(jié)果見表3。
表3 雙青咽喉片對二甲苯誘發(fā)小鼠耳廓腫的影響(略)
與對照組比較*P<0.05，**P<0.01
2.2 雙青咽喉片對濃氨水致小鼠咳嗽的影響 [3] 健康KM種小鼠隨機分成五組，每組10只，分別灌胃給予甘草片0.25g?kg -1 、雙青咽喉片(0.03g?kg -1 、0.06g?kg -1 、0.12g?kg -1 )及等容量的生理鹽水，一天一次，連續(xù)七天，第八天灌胃給藥1小時后將氨水棉球(1.0ml氨水/棉球)置鐘罩內(nèi)，保留1分鐘后將小鼠從罩內(nèi)取出，立即觀察記錄各鼠3分鐘內(nèi)咳嗽次數(shù)，并進行組間比較其顯著性。結(jié)果見表4。
表4 雙青咽喉片對濃氨水致小鼠咳嗽的影響(略)
與對照組比較**P<0.01
2.3 雙青咽喉片對小鼠氣管排泌酚紅的影響 [3] 小鼠分組灌胃同2.2，第八天給藥30分鐘后，腹腔注射5%酚紅0.1ml/10g， 30分鐘處死小鼠，剝離氣管周圍組織，剪下自甲狀腺軟骨下至氣管分支處的一段氣管，放入盛有2mlNS的試管中，加入0.1ml(或12滴)氫氧化鈉，用546nm的分光光度計測OD值，用酚紅作一標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)曲線計算酚紅含量(μg/ml)，與對照組比較。結(jié)果見表5。
表5 雙青咽喉片對小鼠氣管排泌酚紅的影響(略)
與對照組比較**P<0.01
2.4 鎮(zhèn)痛實驗 [3，4]
2.4.1 雙青咽喉片對醋酸致小鼠疼痛的影響 小鼠分組同2.1.2，分別灌胃給予阿司匹林0.1g?kg -1 、雙青咽喉片(0.03g?kg -1 、0.06g?kg -1 、0.12g?kg -1 )及等容量的生理鹽水，一天一次，連續(xù)七天，第八天給藥30分鐘后，腹腔注射0.5%醋酸0.2ml/只，立即觀察記錄各鼠15分鐘內(nèi)出現(xiàn)的扭體次數(shù)，并進行組間比較其顯著性。結(jié)果見表6。
表6 雙青咽喉片對醋酸致小鼠疼痛的影響(略)
與對照組比較**P<0.01
2.4.2 雙青咽喉片對小鼠熱刺激致痛的影響 室溫在15～20℃時，調(diào)節(jié)恒溫水浴箱使水溫恒定在55±0.5℃，放入800ml燒杯預(yù)熱10分鐘后，分別將健康KM種雌性小鼠放入燒杯中，并立即記錄時間，小鼠自放在燒杯中至出現(xiàn)舔后足所需時間(秒)作為該鼠的痛閾值，凡舔后足時間小于5秒或大于30秒或跳躍者棄之不用，將合格的小鼠隨機分為五組重復(fù)測定其正常閾值，取兩次正常痛閾平均值作為該鼠給藥前痛閾值，然后分別灌胃給予阿司匹林0.1g?kg -1 、雙青咽喉片(0.03g?kg -1 、0.06g?kg -1 、0.12g?kg -1 )及等容量的生理鹽水，一天一次，連續(xù)七天，第八天給藥后15、30、60分鐘分別測小鼠痛閾值，如60秒仍無反應(yīng)，其痛閾以60秒計算，以痛閾提高值(給藥后痛閾值減去給藥前痛閾值)，進行組間比較其顯著性。結(jié)果見表7。
表7 雙青咽喉片對小鼠熱刺激致痛的影響(略)
與對照組比較*P<0.05，**P<0.01
3 討論
咽喉炎患者有多種咽部不適，如干燥、灼熱、隱痛發(fā)癢和異物感等 [5] ，目前，臨床上治療急慢性咽喉炎的復(fù)方中藥制劑很多，而復(fù)方中藥物搭配也多種多樣。本方以金銀花、青蒿、青果等為主，金銀花是治療咽炎的一味常用藥，其性甘、寒，歸肺、胃、大腸經(jīng)，清熱解毒作用很強并有疏散風(fēng)熱之力，主要用于外感風(fēng)熱型的急性咽炎，現(xiàn)代研究表明，金銀花的有效成分為氯原酸和異氯原酸，具有廣譜抗菌、抗病毒及消炎作用，能夠抑制多種病菌的生長，并能解熱及促進白細(xì)胞的吞噬功能 [6] ，慢性咽炎常常由細(xì)菌感染所致，因此，用金銀花可起到較好的抑菌作用，對治療咽炎有利;青蒿的有效成分青蒿素，在臨床上常用于治療瘧疾，現(xiàn)有大量研究表明青蒿素對體液免疫有抑制作用，但對細(xì)胞免疫有促進作用，青蒿素對特異性細(xì)胞免疫功能的增強作用，主要能增強效應(yīng)階段Ts細(xì)胞的活性，Ts細(xì)胞是青蒿素效應(yīng)靶細(xì)胞，青蒿素對單核細(xì)胞功能具有抑制作用，對紅細(xì)胞免疫粘附功能也有促進作用 [7] ;青果可清熱解毒、利咽生津，是治療咽喉腫痛的有效中藥。由此可知金銀花、青蒿、青果具有顯著的抗病毒、抗菌、解熱、抗炎、抗過敏等作用，這三種藥物在本方中起到了協(xié)同作用，而本方為純中藥制品，避免了使用抗生素的副作用及產(chǎn)生的耐藥性，且藥價低廉，使用方便，值得臨床推廣應(yīng)用。
通過本次實驗研究發(fā)現(xiàn)，足趾腫脹實驗、毛細(xì)血管通透性實驗及耳廓腫實驗提示雙青咽喉片具有較明顯的抗炎作用;而鎮(zhèn)咳實驗中雙青咽喉片能明顯減少濃氨水引起小鼠的咳嗽次數(shù)表明其具有顯著的鎮(zhèn)咳作用;祛痰實驗中雙青咽喉片可顯著增加氣管排泌酚紅，表明它具有很好的祛痰作用;熱板法和扭體法兩項鎮(zhèn)痛實驗表明雙青咽喉片具有鎮(zhèn)痛作用。
綜上所述，實驗研究證明雙青咽喉片具有抗炎、鎮(zhèn)咳、祛痰及鎮(zhèn)痛作用，為其應(yīng)用于臨床治療急慢性咽喉炎提供了科學(xué)的實驗室依據(jù)，但其作用機制仍有待于進一步研究。
參考文獻
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(瀘州醫(yī)學(xué)院藥理教研室，瀘州 646000)